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DNA变性缓冲液配制全攻略(1L):称取87.7g NaCl和20g NaOH,溶于800mL去离子水,定容至1L,室温保存。核心用途:Southern blot中转膜前的DNA碱变性处理,使双链DNA变为单链以便与探针杂交。关键提醒:NaOH具强腐蚀性,需戴手套护目镜;长期放置会吸收CO₂导致···
鲑鱼精DNA(Salmon DNA,10mg/mL)配制全攻略(约100mL):称取2g鲑鱼精DNA溶于200mL TE Buffer,室温搅拌2-4小时,加4mL 5M NaCl至终浓度0.1M,酚和酚/氯仿各抽提1次,乙醇沉淀后重溶于100mL去离子水,OD260定量后稀释至10mg/mL,煮沸10分钟分装,-20℃保存。···
溴乙锭溶液配制全攻略(100mL,10mg/mL):称取1g溴乙锭,加去离子水定容至100mL,搅拌至完全溶解,转移至棕色瓶室温避光保存。工作浓度为0.5μg/mL(即1:20000稀释)。核心用途:DNA琼脂糖凝胶电泳染色。关键提醒:溴乙锭是强致癌物,必须在通风橱中操作,佩···
10×Loading Buffer配制全攻略(10mL):200μL 0.5M EDTA(pH8.0)+ 25mg溴酚蓝 + 25mg二甲苯青FF + 5mL甘油,DEPC处理水定容至10mL,室温保存。核心用途:RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液,实时监控电泳进程。关键提醒:用于RNA电泳时,配制用水必须使···
6×Loading Buffer配制全攻略(500mL):称取4.4g EDTA、250mg溴酚蓝、250mg二甲苯青FF,加入180mL甘油,用2N NaOH调pH至7.0,定容至500mL。使用时按1:5比例与样品混合(1份Buffer + 5份样品)。关键提醒:甘油低温结晶属正常现象,37℃水浴复溶即可。核酸电泳···
10×MOPS缓冲液配制全攻略(1L):称取41.8g MOPS溶于700mL DEPC处理水,用2N NaOH调pH至7.0,加入20mL 1M NaOAc(DEPC处理)和20mL 0.5M EDTA(pH8.0,DEPC处理),定容至1L,0.45μm滤膜过滤,室温避光保存。核心用途:RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳核心缓冲液···
Agarose 凝胶 2026-07-15
琼脂糖凝胶配制全攻略:选择合适缓冲液(0.5×TBE或1×TAE),微波炉加热熔化琼脂糖(注意暴沸风险),冷却至60℃加溴乙锭(终浓度0.5μg/mL),倒胶凝固。附琼脂糖凝胶浓度与线形DNA最佳分辨范围对照表(0.5%~2.0%对应50bp~30kb)。关键提醒:制胶与电泳缓冲···
10×TBE缓冲液配制全攻略(1L):称取108g Tris碱、55g硼酸、7.44g Na₂EDTA·2H₂O,定容至1L,pH自然稳定在8.3,室温保存。使用时稀释10倍(100mL母液定容至1L)即得1×TBE工作液。关键提醒:TBE缓冲容量强于TAE,适合长时间电泳,但硼酸可能抑制酶活性,酶···
50×TAE缓冲液配制全攻略(1L):称取242g Tris碱、37.2g Na₂EDTA·2H₂O,加入57.1mL冰乙酸,定容至1L,室温保存。使用时稀释50倍(20mL母液定容至1L)即得1×TAE工作液。关键提醒:TAE缓冲容量较小,不建议长时间电泳(如过夜);低温出现沉淀属正常现象,···
10×TE Buffer配制全攻略(1L):100mL 1M Tris-HCl(pH7.4/7.6/8.0)+ 20mL 0.5M EDTA(pH8.0),定容至1L,高压灭菌,室温保存。使用时无菌水稀释10倍即为1×TE。关键提醒:用于RNA保存时需用DEPC处理水配制;低温沉淀属正常现象,37℃水浴复溶即可。DNA/RN···