




产品概述
蛋白酶K(Proteinase K)
科研实验专用 · 高纯度广谱蛋白酶 · 无DNase/RNase
适配核酸提取、蛋白消化、分子生物学研究
产品概述
蛋白酶K(Proteinase K)是一种来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album) 的枯草蛋白酶类高活性丝氨酸蛋白酶。该酶具有极其广泛的底物特异性,能够高效切割脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和疏水性氨基酸的羧基端肽键。其强大的蛋白水解能力,使其成为分子生物学、细胞生物学及生物制药等领域中不可或缺的核心工具酶。
在分子生物学实验中,蛋白酶K凭借其广谱高效的蛋白降解能力、优异的稳定性以及对多种变性剂的耐受性,广泛应用于基因组DNA抽提、RNA提取中的蛋白去除、组织消化、细胞裂解等关键步骤。本产品经过严格纯化工艺处理,不含DNase、不含RNase、无核酸残留,确保在高效去除杂质蛋白的同时,不会对核酸样本造成任何降解,是科研工作者获取高纯度核酸、保障实验数据可靠性的理想选择。
核心优势
一、广谱高效,蛋白水解能力出众
蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶,能够高效降解多种天然蛋白质。其无明显的切割特异性,可在脂肪族、芳香族或疏水性氨基酸的羧基侧裂解肽键。在核酸提取过程中,蛋白酶K能够快速消化细胞裂解释放的组蛋白、核酸结合蛋白及其他杂质蛋白,同时有效灭活内源性RNase和DNase,保护核酸免受降解。与蛋白酶K作用的最小的肽是四肽,其对天然蛋白质的酶切降解极为有效。
二、耐受性强,在变性剂中活性更优
蛋白酶K最显著的特点之一是对多种化学变性剂具有优异的耐受性。该酶不受EDTA、尿素(1-4 M)、柠檬酸和碘乙酸的抑制,并且在0.5-1% SDS的溶液中其活性反而更高。这一特性使其特别适合与SDS、EDTA等常用细胞裂解液成分联合使用,在核酸提取过程中可同步完成细胞裂解与蛋白消化,大幅简化实验流程。此外,Ca²⁺可以保护蛋白酶K不会自我降解、增加其热稳定性。
三、宽pH与温度范围,实验条件灵活
蛋白酶K在极宽的pH范围内保持稳定和活性——有效pH范围为pH 4.0-12.5,最佳pH范围为pH 7.5-8.0。其最佳反应温度为65℃,在20℃至60℃范围内均具有良好活性。95℃加热10分钟即可使蛋白酶K完全失活,便于实验后的终止处理。宽泛的活性条件赋予了实验设计极大的灵活性,可根据不同样本类型优化反应温度和时间。
四、高纯度、无核酸酶污染
本产品经过色谱纯化等多步精制工艺处理,纯度高达≥95%,比活性≥30 U/mg蛋白。经严格质检,不含DNase、不含RNase、无核酸残留。这一高纯度标准确保在去除杂质蛋白的同时,不会引入核酸酶污染,保障核酸模板的完整性和下游实验的可靠性。批次间表现均一、性能稳定,可提供可重复的实验结果。
五、重组表达,批次一致性更优
本产品通过基因重组技术,在林伯氏白色念球菌或酵母菌株中高效表达纯化而成。相比传统天然菌株提取工艺,重组蛋白酶K具有批间差更小、产能更大、供应更有保障的优势。酶粉末在-20℃保存一年,酶活下降不超过2%;在25℃保存4个月,酶活下降均不超过4%。部分产品可稳定贮存长达24个月。
六、多剂型可选,适配不同实验场景
本产品提供多种剂型与规格,灵活适配各类实验需求:
冻干粉形式:白色或类白色粉末,便于长期保存和精确称量
溶液形式:20 mg/mL无菌溶液,即开即用,常用工作浓度为0.05~1 mg/mL
分子生物学级:经过严格质控,专用于核酸提取等对纯度要求极高的实验
核心应用场景
一、核酸提取(核心应用)
蛋白酶K是基因组DNA和总RNA提取流程中不可或缺的关键试剂。其核心作用包括:
裂解细胞:高效降解细胞和组织中的结构蛋白,释放胞内核酸
灭活核酸酶:快速消化内源性RNase和DNase,保护核酸免受降解
解离核蛋白复合物:去除与DNA/RNA结合的组蛋白及其他蛋白,提升核酸纯度和得率
在病毒核酸提取中,蛋白酶K可有效裂解病毒衣壳释放核酸,同时消除RNase防止病毒RNA降解。
二、组织消化与细胞裂解
在动物组织、植物组织及微生物样本的前处理中,蛋白酶K可高效消化结缔组织、细胞壁及细胞膜结构,释放细胞内含物。适用于小鼠基因型鉴定(鼠尾裂解) 、石蜡包埋组织切片脱蛋白处理等实验场景。
三、蛋白质研究
蛋白质一般降解:用于生物样品中蛋白质的广泛消化
蛋白质印迹(Western Blot) :用于样本前处理中的蛋白消化
多肽和氨基酸制备:用于蛋白质水解制备多肽和氨基酸
四、法医学与病原检测
在法医学中,蛋白酶K用于降解检材中的干扰蛋白,提高DNA指纹分析的准确性。在新冠病毒核酸检测等病原检测流程中,蛋白酶K是病毒核酸释放的关键试剂。
五、染色体DNA制备与脉冲电泳
蛋白酶K可用于制备脉冲场凝胶电泳(PFGE)所需的染色体DNA,在细菌分子分型等研究中具有重要应用。
技术参数
| 项目 | 详情 |
|---|---|
| 产品名称 | 蛋白酶K(Proteinase K) |
| 英文名称 | Proteinase K |
| CAS号 | 39450-01-6 |
| 来源 | 林伯氏白色念球菌(Tritirachium album) |
| 分子量 | ~28-29 kDa |
| 级别 | 色谱纯化 / 分子生物学级 |
| 纯度 | ≥95% |
| 比活性 | ≥30 U/mg protein |
| 酶活定义 | 37℃、pH7.5条件下,每分钟水解酪蛋白生成1 μmol酪氨酸的酶量 |
| 有效pH范围 | pH 4.0-12.5 |
| 最佳pH范围 | pH 7.5-8.0 |
| 最佳反应温度 | 65℃ |
| 失活条件 | 95℃加热10分钟 |
| 产品形式 | 冻干粉 / 溶液(20 mg/mL) |
| 储存条件 | -20℃冷冻保存 |
使用建议
一、核酸提取中的推荐方案
反应体系:根据样本类型,推荐工作浓度0.05~1 mg/mL
反应条件:55-65℃孵育15-60分钟(组织样本建议延长至过夜)
失活处理:95℃加热10分钟使蛋白酶K完全失活
二、注意事项
蛋白酶K在SDS、EDTA、尿素等变性剂存在下仍保持高活性,可与裂解液联合使用
Ca²⁺可增强蛋白酶K的热稳定性,在反应体系中可考虑添加
处理RNA样品时,务必使用不含RNase的蛋白酶K
冻干粉使用前需用无菌水或合适缓冲液溶解
品质保障
经过色谱纯化等多步精制工艺,纯度≥95%
严格质控:不含DNase、不含RNase、无核酸残留
批次间性能高度一致,提供可重复的实验结果
重组表达工艺,批间差更小、供应更有保障
适用于分子生物学、细胞生物学及生物化学研究
储存与运输
储存条件:-20℃冷冻保存
运输条件:蓝冰/干冰运输
有效期:详见产品标签(部分产品可达24个月)
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