条带弥散、DNA跑不动？电泳缓冲液可能选错了

做核酸电泳的同学都懂——配好了胶、加好了样，满怀期待去跑电泳，结果条带弥散、拖尾严重，甚至DNA直接“跑不动”。你换了胶、调了电压、检查了核酸样品，最后发现是电泳缓冲液出了问题。那TBE缓冲液到底是什么？怎么配才靠谱？

一、TBE缓冲液是什么？

TBE（Tris-Borate-EDTA）是分子生物学中最常用的核酸电泳缓冲液之一^[1][6]。Tris提供弱碱性环境，使DNA带上负电荷向正极迁移；EDTA螯合Mg²⁺等二价金属离子，抑制核酸酶活性，保护DNA不被降解^[1]。

TBE的核心优势：缓冲能力强，适合较长时间电泳，分辨率高，尤其适合小于1 kb的DNA片段分离^[1][5][6]。

⚠️ TBE vs TAE怎么选？ TBE缓冲能力强，适合长时间电泳和小片段（<1.5 kb）分离；但硼酸会抑制后续酶反应和DNA回收效率，若需回收DNA进行酶切或连接，建议使用TAE^[1][5][6]。

二、配方成分与表格

TBE常配制成5×或10×浓缩贮存液，使用时稀释。10×浓缩液不太稳定易沉淀，5×更稳定^[2]。

配比仅供参考，不同品牌试剂纯度有差异^[2]。

三、配制步骤（以配制1 L 10× TBE贮存液为例）^[1][6]

1. 称量：称取108 g Tris碱和55 g 硼酸。

2. 溶解：加入约600 mL去离子水，搅拌至完全溶解。

3. 加入EDTA：加入40 mL 0.5 M EDTA（pH 8.0） 。

4. 定容：加去离子水定容至1 L，充分混匀。

5. pH检查：10×TBE的pH应约为8.3，通常无需调节。

6. 保存：室温保存。

稀释使用：

⚠️ 关键提醒^[1][6]：

• 10×浓缩液不稳定，易产生沉淀。若出现沉淀，可37℃水浴加热溶解（如溶解缓慢，可升温至50℃加速溶解），不影响使用。沉淀过多则建议弃用。

• 配制好的TBE室温即可保存。常规TBE缓冲液一般无需高压灭菌；如需无菌（如RNA电泳），可用0.22 μm滤膜过滤除菌。

• 建议使用新鲜稀释的工作液，存放过久可能影响电泳效果。

• 核酸琼脂糖凝胶电泳通常推荐使用0.5× TBE工作液，可减少电泳过程中的焦耳热，条带更清晰。

• TBE中的硼酸会抑制酶反应，若后续需进行DNA回收和酶切，建议改用TAE缓冲液。

四、商业化便捷选择——杭州富沃克生物

自己配制TBE缓冲液虽然步骤清晰，但Tris和硼酸的精确称量、EDTA的准确加入——每一步都影响最终的电泳效果。如果追求省心省力，可以直接选择成熟的商业化产品。

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参考文献

[1] TBE缓冲液[EB/OL]. 维基百科, 2017-08-28. https://zh.wikipedia.org/wiki/TBE緩衝液

[2] TBE电泳缓冲粉剂(10X)[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-10-23. https://www.biomart.cn/infosupply/73828631.htm

[3] 5×TBE Buffer 5×TBE缓冲液[EB/OL]. 茂康生物. https://www.maokangbio.com/productView.action?id=11935

[4]  10X TBE电泳缓冲液[EB/OL]. 富沃克生物. https://www.fwkbio.com/lm3/149.html

[5] 10X TBE BUFFER[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-03-20.

[6] TBE缓冲液[EB/OL]. 百度百科. https://wapbaike.baidu.com/item/tbe/3946427