学习笔记 | TBST缓冲液的配置方法

在蛋白质研究的实验室里，TBST溶液常年活跃在免疫印迹、免疫组化等关键生物实验中，它既能清除杂质的干扰，又能为蛋白质的特异性识别创造稳定的环境。

TBST溶液的英文全称是：Tris-Buffered Saline with Tween-20，中文对应为：三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水-吐温20。从名称中就能够清晰地看出它的核心成分：作为缓冲基础的Tris（三羟甲基氨基甲烷）、提供离子强度的生理盐水成分（通常是氯化钠），以及作为非离子型去污剂的Tween-20（吐温20）。这三种成分按比例精准混合溶解后，再调节pH值至7.4左右（该pH值接近人体生理pH，能维持蛋白质的天然构象），就形成了实验室常用的TBST溶液。和很多实验室的试剂一样，TBST也常配置为浓缩液，使用时用蒸馏水稀释至1倍工作液，兼顾储存便利性和浓度准确性。

以下是10× TBST溶液的配置方法：

 10X TBST.pdf

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富沃克 TBST洗膜缓冲液10X TBS+吐温抗体稀释液 WB洗膜封闭液配制

使用TBST溶液时，以下几个注意事项需要谨记：

1. 操作规范：虽然TBST相对温和，但仍需佩戴手套、实验服等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛，若不慎接触，需立即用大量蒸馏水冲洗。

2. 稀释与配置：浓缩液稀释时必须使用无杂质的蒸馏水或去离子水，自来水中的金属离子、微生物可能会干扰实验结果；配置时要确保各成分完全溶解，并使用pH计校准PH值至7.4±0.2。

3. 储存条件：1倍工作液建议现配现用，若需短期储存，应密封后置于4℃冰箱中，储存时间不宜超过一周；浓缩液可在常温或4℃冷冻储存。

4. 废液处理：使用后的TBST溶液需按照实验室废液处理规范收集，不可直接倒入下水道，尤其是含有抗体或蛋白质的废液，需经过灭菌处理后再排放，避免污染环境。